Utilización de tecnologia en función del propósito

Los métodos de detección de ADN como el de reacción en cadena de la polimerasa o PCR, pueden no indicar la presencia de proteínas alergénicas, por lo que un resultado de PCR negativo no garantiza la ausencia de proteínas.

Por este motivo es preferible la utilización de métodos de detección de proteínas o péptidos, aunque la directiva europea 2007/68/ce plantea que todos los derivados de alérgenos alimentarios que contenga el producto, deben aparecer en el etiquetado, sin distinción entre proteínas u otros compuestos como metabolitos o ADN.

Tecnologias recomendadas para aplicaciones tipicas: Debido a que es una técnica cuantitativa, se recomienda utilizar el análisis de ensayos de inmuno-absorción enzimática (Elisa), para la verificación de procesos de limpieza o para las pruebas de componentes o productos terminados.

Los dispositivos de flujo lateral o LFD se pueden utilizar en el sitio, para chequeos de rutina de verificación de limpieza, pero deben ser confirmados de forma regular mediante análisis ELISA.

Si el resultado del método basado en proteínas es ambiguo, el resultado obtenido de la prueba PCR se puede utilizar como una confirmación auxiliar. Sin embargo, dada la sensibilidad de la prueba PCR a determinados alérgenos, esto sería aceptable cuando el resultado ELISA sea mayor a 10-20 mg/kg (ppm).

Sólo se recomienda la utilización de la prueba PCR, cuando no se disponga de otra tecnologia de detección basada en proteínas, como puede ser para la detección de frutos de cascara distintos a las nueces, avellanas o almendras o para la detección de apio.

Los LFD deben usarse en el sitio, para inspecciones de rutina de verificación de limpieza o para pruebas con el propósito del lanzamiento de un producto finalizado.

La metodología de espectrometria de masas (EM) no es una técnica convencional, por lo que debe ser utilizada si los resultados obtenidos con métodos convencionales son divergentes, y se requiere una segunda prueba de confirmación.

Métodos basados en la detección de proteínas:

• La proteína es el objetivo principal en la detección, debido a que la mayoría de los alérgenos alimentarios enumerados en el apéndice iii de la directiva 2007/68 /ce son proteínas, excepto el sulfito y el dióxido de azufre.

Se pueden dividir en dos categorías los métodos basados en la detección de proteínas.

Métodos inmunológicos:

• Este tipo de método está basado en anticuerpos. Se utiliza para detectar las proteínas un anticuerpo, similar al que causa la reacción alérgica en los humanos.

• Los métodos tipicos son el ensayo de inmuno-absorción enzimática (ELISA) y los dispositivos de flujo lateral (LFD) conocidos como tiras reactivas.

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